ANÁLISIS DE UN ARTÍCULO DE PCR SOBRE DIABETES MELLITUS MITOCONDRIAL

Diabetes de Herencia Materna y Sordera (DHMS)

TEMA: Glomeruloesclerosis segmentaria focal asociada con diabetes y sordera heredadas por la madre: análisis clínico patológico.

OBJETIVOS: Determinar la relación de glomeruloesclerosis con DHMS, investigar las características clínicas y las anomalías del ADN mitocondrial para el probando y su madre.

TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA: Sangre periférica

TIPO DE ÁCIDO NUCLÉICO: ADN mitocondrial extraído con el sistema  GeneAmp PCR 9600  (Perkin-Elmer, Norwalk, CT, USA).

GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: MT-TL1 (Gen que codifica para tRNA mitocondrial para la leucina) (429 pb)

TIPO DE PCR: PCR-RFLP

Inicial: 1 min a 94°C

35 ciclos:

D: 94°C por 30 segundos

H: 53-62°C por 60 segundos

E: 72°C por 10 minutos

Los fragmentos amplificados fueron digeridos con endonucleasas de restricción (ApaI, AflII, BglI, or HpaII; Takara Biomedical)

VISUALIZACIÓN: Electroforesis en gel de agarosa al 2%

PRIMERS UTILIZADOS EN EL ESTUDIO 

REFERENCIAS: 
Focal segmental glomerulosclerosis associated with maternally inherited diabetes and deafness: Clinical pathological analysis